PESQUISA VETERINÁRIA BRASILEIRA

Abstract in English:

ABSTRACT.- Dos Santos C.S., De Jesus V.L.T., McIntosh D., Berto B.P. & Lopes C.W.G. 2015. Co-infection by Tritrichomonas foetus and Pentatrichomonas hominis in asymptomatic cats. Pesquisa Veterinária Brasileira 35(12):980-988. Curso de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias, Anexo 1, Instituto de Veterinária, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, Campus de Seropédica, BR-465 Km 7, Seropédica, RJ 23897-970, Brazil. E-mail: carolinespitz@yahoo.com.br Tritrichomonas foetus, a parasite well known for its significance as a venereally transmitted pathogen in cattle, has been identified as a cause of chronic large bowel diarrhea in domestic cats in many countries of the world. In Brazil, several studies on the diagnosis of bovine trichomoniasis have been performed, but until now, no study was made regarding feline trichomoniasis. Thus, this is the first study to report the occurrence of T. foetus and Pentatrichomonas hominis in cats using morphological and molecular analysis. Feces from 77 cats were examined, four of which (5.2%) were positive for the presence of parabasalids. Morphological analysis of stained smears revealed piriform trophozoites showing the three anterior flagella, elongated nucleus and axostyle ending abruptly in fillet, characteristic of T. foetus. In scanning and transmission electron microscopy, identification characters similar to those previously reported for T. foetus were observed. The cultures containing trophozoites were submitted for molecular analysis, which resulted positive for T. foetus DNA using specific primers (TFR3 and TFR4), and all samples were positive and subjected to sequencing in which they showed 99.7-100% similarity with another isolate sequencing of T. foetus (JX960422). Although no trophozoite with consistent morphology of P. hominis has been visualized in the samples, differential diagnosis was performed using specific primers for P. hominis (TH3 and TH5) amplicon. In three of the four samples (3.89%) sequencing revealed 100% similarity when compared with another sequence of P. hominis deposited in Genbank (KC623939). Therefore, the present study revealed through the diagnostic techniques employed the simultaneous infection by T. foetus and P. hominis in the feces of cats. However, it was necessary to use more than one technique for the diagnosis of the co-infection. These results demonstrate the importance of a correct diagnosis to allow an appropriate treatment by the veterinarian.

• Tritrichomonas foetus Pentatrichomonas hominis

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Dos Santos C.S., De Jesus V.L.T., McIntosh D., Berto B.P. & Lopes C.W.G. 2015. Co-infection by Tritrichomonas foetus and Pentatrichomonas hominis in asymptomatic cats. [Co-infecção por Tritrichomonas foetus e Pen- tatrichomonas hominis em gatos assintomáticos.] Pesquisa Veterinária Brasileira 35(12):980-988. Curso de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias, Anexo 1, Instituto de Veterinária, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, Campus de Seropédica, BR-465 Km 7, Seropédica, RJ 23897-970, Brazil. E-mail: carolinespitz@yahoo.com.br Tritrichomonas foetus, um parasito bem conhecido por seu significado como um agente patogênico transmitido venereamente em bovinos, também foi identificado como causa de diarreia crónica do intestino grosso em gatos domésticos em muitos países. No Brasil, vários estudos sobre o diagnóstico de tricomonose bovina foram realizados, mas até agora, não há informação disponível em relação à trichomonose felina. Assim, este é o primeiro estudo a relatar a ocorrência de T. foetus e Pentatrichomonas hominis em gatos por meio de análise morfológica e molecular. Fezes de 77 gatos foram examinadas, a partir da qual quatro (5,2%) foram positivas para a presença de parabasalídeos. A análise morfológica de esfregaços corados revelou trophozoitos piriformes com três flagelos anteriores, núcleo alongado e axóstilo cuja projeção termina abruptamente em formato de filete, características estas de identificação morfológica T. foetus. Além disso, microscopia eletrônica de varredura e transmissão, revelaram caracteres morfológicos semelhantes aos descritos na literatura para esta espécie. A análise molecular de culturas utilizando iniciadores específicos para trofozoítos de T. foetus (TFR3 e TFR4), mostrou que as quatro amostras foram positivas para este parasito e osequenciamento dos fragmentos amplificados demonstraram 99,7-100% de similaridade com seqüências depositadas no GeneBank de T. foetus. Nenhum trofozoíto com morfologia consistente com a descrição de P. hominis foi visualizado nas amostras. No entanto, a análise molecular, utilizando iniciadores específicos para esta espécie (TH3 e TH5) detectou que três das quatro amostras (75%) também foram positivas para P. hominis e o sequenciamento de nucleotideos revelou 100% de similaridade dos amplicons quando comparada com o mesmo fragmento de DNA de P. hominis depositado no GenBank. Como tal, o presente estudo relata a coinfecção de gatos com T. foetus e P. hominis e destacou a exigência de uma combinação de métodos para o diagnóstico de coinfecções. Estes resultados demonstram a importância do diagnóstico correto para a aplicação da terapia apropriada por parte dos veterinários.

Abstract in English:

The study of a vaccine containing 13 cultures of Campylobacter fetus subsp. venerealis and one intestina/is was carried out. These cultures were isolated in Rio de Janeiro State from animals suffering of reproductive diseases, from an aborted fetus and from the foreskin cavity of infected bulis. Those cultures were inactivated by a 0,5% formalin solution and treated by heating at 37ºC for 24h in oily adjuvant. The immunogenicity of the vaccine was assayed on two groups of eight half-breed virgin Holstein aging over two year old weighing over 300 kg. This was performed by infecting subcutanously 5.0 m1 of the vaccine in both groups. The second group animals received a 5.0 m1 booster 14 days later. lndirect immunofluorescence and serum-agglutination test showed an optimal antibody production at 30th and 36th days, respectively for animals vaccinated with one and two doses. Sixty days after the first vaccination the heifers were infected with 4 x 106 cells (culture RJ 14, Campylobacter fetus subsp. venerealis) at the moment of artificial insemination at the cervicovaginal region. The reproductive efficacy of 100 and 75%, for one and two doses respectively, with three inserninations, showed to be the best way to assay immunity confered by the vaccine. On the other hand, for the eight heifers composing group II, 15 inseminations were necessary for na efficiency of 100%, or 1.8 semen doses, for fertilization. The result was superior to that of group III, in which 16 inseminations were necessary for pregnancy in 7 out of 8 heifers; na efficiency of 7 5%, or 2.2 semen doses, for fertilization. The control group of 8 heifers presented only 4 pregnancies from 19 inserninations, or 4. 7 semen doses, for fertilization. The opsonizating effect of IgG was the responsible by the absence of microorganisms in the cervico mucous of the vaccinated heifers. However the presence of rnicroorganisms in some heifers did not affect the reproductive efficacy in these animals.

• Vibrio fetus vaccination vibriosis control method evaluation

Abstract in Portuguese:

O presente estudo trata de uma vacina contendo 13 culturas de Campylobacter fetus subsp. venerealis e uma cultura do Campylobacter fetus subps. intestinalis, isoladas no Estado do Rio de Janeiro, provenientes de animais com problemas de reprodução, de um feto abortado e da cavidade prepucial de touros infectados, inativada pelo formal a 0,5% e normalizada pelo calor à 37°C por 24h em adjuvante oleoso. Para a pesquisa da ação imunogênica da vacina foram empregados dois grupos compostos por oito novilhas virgens mestiças de holandês, com idades acima de dois anos e pesos acima de 300 kg. A vacinação realizou-se com uma aplicação de 5,0 m1 da vacina na região cervical via subcutânea, sendo que no segundo grupo, houve uma vacinação com mais 5,0 m1 com intervalo de 14 dias entre as doses. Os testes de imunofluorescência indireta e de soroaglutinação, indicavam haver um ótimo pique na média da produção de anticorpos para o grupo vacinado com uma dose ao 309 dia e no 369 dia para o grupo vacinado com duas doses. Após 60 dias da primeira vacinação, os animais foram contaminados com 4 x .106 células da amostra RJ 14 do Campylobacter fetus subsp. venerealis no momento da primeira inseminação artificial na região anterior da vagina. A eficâcia de 100 e 75% para uma dose e duas doses da vacina respectivamente com base no desempenho reprodutivo obtido com no máximo três inseminações, demonstrou ser o melhor método de avaliação da imunidade conferida pela vacina. Por outro lado, para as oito novilhas que compunham o grupo II foram necessárias 15 inseminações para se obter a eficiência de 100%, ou seja, 1,8 dose de sêmen por fecundação. Tal resultado foi superior ao do grupo III, no qual, dentre oito novilhas, sete ficaram gestantes, sendo necessárias 16 inseminações para se obter uma eficiência de 75%, ou seja, 2,2 doses de sêmen por fecundação. O grupo controle apresentou apenas quatro novilhas gestantes e requereu 19 inseminações, ou seja, 4, 7 doses de sêmen por fecundação. A opsonização pelo IgG foi a responsável pela ausência do microrganismo no muco cérvico-vaginal de novilhas vacinadas, porém, a presença de microrganismo no muco cérvico-vaginal de algumas novilhas não afetou a eficiência r*eprodutiva desses animais.

• Vibrio fetus vacinação vibriose método de controle avaliação